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通用型反相液相色譜柱在使用緩沖液的過(guò)程中要注意這幾點(diǎn)

時(shí)間:2019-6-26 閱讀:2821
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通用型反相液相色譜柱優(yōu)點(diǎn)是固定相穩(wěn)定,應(yīng)用廣泛,可使用多種溶劑。但硅膠為基質(zhì)的填料,使用時(shí)一定要注意流動(dòng)相的PH范圍。一般的C18柱PH值范圍都在2-8,流動(dòng)相的PH值小于2時(shí),會(huì)導(dǎo)致鍵合相的水解;當(dāng)PH值大于7時(shí)硅膠易溶解;經(jīng)常使用緩沖液固定相要降解。
 
通用型反相液相色譜柱在使用前,要進(jìn)行柱的性能測(cè)試,并將結(jié)果保存起來(lái),作為今后評(píng)價(jià)柱性能變化的參考。在做柱性能測(cè)試時(shí)要按照色譜柱出廠報(bào)告中的條件進(jìn)行(出廠測(cè)試所使用的條件是較佳條件),只有這樣,測(cè)得的結(jié)果才有可比性。但要注意:柱性能可能由于所使用的樣品、流動(dòng)相、柱溫等條件的差異而有所不同。
 
通用型反相液相色譜柱在使用緩沖液的過(guò)程中還要注意以下幾點(diǎn):
  a.避免使用鹽酸鹽,鹽酸鹽對(duì)鋼質(zhì)有腐蝕作用;
  b.緩沖液要現(xiàn)配現(xiàn)用,往往緩沖液是良好的菌類(lèi)培養(yǎng)液,隔天或放置長(zhǎng)時(shí)間實(shí)驗(yàn)時(shí)會(huì)發(fā)生很多怪現(xiàn)象;
  c.使用緩沖液要及時(shí)掌握pH范圍,做到胸中有數(shù);
  d.清洗液路和柱子時(shí),有溫控可加熱到30攝氏度易于沖洗;
  e.長(zhǎng)時(shí)間用緩沖溶液要注意觀察接頭處有無(wú)析出,若有白色鹽類(lèi)析出,定期用10%硝酸沖洗液路(拆下柱子,沖洗30mL10%硝酸溶液,再用5倍水沖洗)可以避免液路的堵塞;
  f.選擇緩沖液要用可靠的試劑,避免不純的鹽類(lèi)造成不必要的麻煩;
  過(guò)渡流動(dòng)相是指有機(jī)相和水相的組成與分析流動(dòng)相相同,但是不含緩沖鹽的溶液。

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