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中級(jí)會(huì)員 | 第17年

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維護(hù)液相色譜的有關(guān)知識(shí)和經(jīng)驗(yàn)

時(shí)間:2010/5/27閱讀:2617
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一、混合溶劑必需要過濾以后才能混合,萬一要混合后過濾的話,只能用有機(jī)的,不能用水系的。由于水系的材料是纖維素,有機(jī)相回或多或少的溶解一點(diǎn)纖維素的,造成污染。
  二、標(biāo)樣或樣品用活動(dòng)相溶解(排除特殊情況),可以避免良多麻煩。
  三、給色譜柱加溫,溫度升高的目的,部門在于增加溶質(zhì)的溶解度,但更重要的是降低溶劑的黏度,從而改進(jìn)峰形和分離度。留意:溫度升高會(huì)降低留存時(shí)間,這對分離度也有影響,溫度的變化對譜帶寬度的影響甚大,而塔板高度受溫度的影響固然也取決于所采用的色譜類型,而溫度升高老是要降低塔板高度的。
  四、C18柱的柱溫一般不要超過40攝氏度,否則健合相輕易脫落的。
  五、進(jìn)樣器使用,除每次用水清洗外,隔一段時(shí)間后,用甲醇或乙腈反復(fù)吸取,清洗一下。
  六、用HPLC進(jìn)行分析時(shí)留存時(shí)間有時(shí)發(fā)生漂移,有時(shí)發(fā)生快速變化,原因何在?如何解決?
  答:關(guān)于漂移題目:
  1、溫度控制不好,解決方法是采用恒溫裝置,保持柱溫恒定
  2、活動(dòng)相發(fā)生變化,解決辦法是防止活動(dòng)相發(fā)生蒸發(fā)、反應(yīng)等
  3、柱子未平衡好,需對柱子進(jìn)行更長時(shí)間的平衡
  七、關(guān)于快速變化題目:
  1、流速發(fā)生變化,解決辦法是重新設(shè)定流速,使之保持不亂
  2、泵中有氣泡,可通過排氣等操縱將氣泡趕出。
  3、活動(dòng)相分歧適,解決辦法為改換活動(dòng)相或使活動(dòng)相在控制室內(nèi)進(jìn)行適當(dāng)混合
  八、液相色譜中峰泛起拖尾或泛起雙峰的原因是什么?
  1、篩板堵塞或柱失效,解決辦法是反向沖刷柱子,替代篩板或更換柱子。
  2、存在干擾峰,解決辦法為使用較長的柱子,改換活動(dòng)相或更換選擇性好的柱子
  九、毛細(xì)管色譜分流進(jìn)樣時(shí),非線性分流的主要原因是什么?
  1、進(jìn)樣器溫度太低,樣品汽化不*,發(fā)生分級(jí)分流。
  2、進(jìn)樣器溫度太高,某些組分可能發(fā)生熱分解,也有的樣品可能發(fā)生催化分解,或樣品部門地被吸附在進(jìn)樣器內(nèi)表面上。
  3、在分流點(diǎn)以前樣品沒有混合平均或混合不充分。
  4、系統(tǒng)的進(jìn)樣墊,柱接頭等地方漏氣。
  十、做液相色譜分析時(shí),柱壓不不亂,原因何在?如何解決?
  答:原因可能有:
  1、泵內(nèi)有空氣,解決的辦法是清除泵內(nèi)空氣,對溶劑進(jìn)行脫氣處理;
  2、比例閥失效,更換比例閥即可。
  3、泵密封墊損壞,更換密封墊即可。
  4、溶劑中的氣泡,解決的辦法是對溶劑脫氣,必要時(shí)改變脫氣方法;
  5、系統(tǒng)檢漏,找出漏點(diǎn),密封即可。
  6、梯度洗脫,這時(shí)壓力波動(dòng)是正常的。
  十一、做PGS/MS分析時(shí),如何防止焦油狀污染物進(jìn)入毛細(xì)柱?
  答:聚合物,尤其是一些含氮、硫及鹵素的高分子裂解時(shí),常有焦油狀物質(zhì)產(chǎn)生。為防止這種焦油狀物質(zhì)進(jìn)入毛細(xì)柱造成污染而使柱機(jī)能下降,可采用保護(hù)預(yù)柱,即在裂解器與毛細(xì)柱之間接一填充預(yù)柱,通過控制預(yù)柱溫度而使焦油狀物質(zhì)滯留在預(yù)柱內(nèi),預(yù)注可置于GC氣化室內(nèi),這樣既輕易控制溫度,又減少系統(tǒng)的死體積,當(dāng)然,預(yù)柱填料需常常更換。
  十二、我zui近更換了另一種牌號(hào)的ODS柱,固然分離情況仍可以,但留存時(shí)間不能重現(xiàn),為什么?
  答:這是由于被分析物可能具有形成氫健的能力。液相色譜儀盡管過去幾年來,填料的制造技術(shù)有了極大的進(jìn)步,但不同的廠商的ODS填料表面硅醇基的濃度不同。恰是這些硅醇基可能與樣品發(fā)生相互作用。因此,統(tǒng)一被分析物中的各組分在不同牌號(hào)的ODS柱上的相對留存時(shí)間就可能不同。在活動(dòng)相中加入少量競爭物,如三乙基胺(TEA),將會(huì)使硅醇基的成鍵能力飽和,從而保證不同牌號(hào)柱子上的相對留存時(shí)間具有較好的重現(xiàn)性。
  十三、高溫毛細(xì)柱的使用壽命一般為多長?
  答:毛細(xì)柱壽命除決定于柱子本身的機(jī)能外,在很大程度上取決于使用情況,好比使用溫度、樣品狀態(tài),進(jìn)樣量等,假如在其使用溫度范圍內(nèi),樣品干凈,色譜柱不被污染的情況下,柱子壽命一般在23年之間。

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