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配置瓊脂糖凝膠的方法2024/1/29
1.用于制備膠液的錐形瓶體積應(yīng)為膠液體積的2-4倍，緩慢向緩沖液中加入瓊脂糖，邊加邊攪拌，防止瓊脂糖聚集。記錄瓶體和溶液總重量。2.微波爐高火加熱30s，根據(jù)配制的溶液體積調(diào)整加熱時間。加熱時間與微波...
配置培養(yǎng)基過程中常見的問題2024/1/22
一、培養(yǎng)基顏色不正確（1）含有酸堿指示劑的培養(yǎng)基，若顏色不正確，通常是由于pH不正確導(dǎo)致的，加熱過度、錯誤的滅菌方式等都會導(dǎo)致此項問題。（2）加熱過度導(dǎo)致某些成分分解或糖焦化，如SC培養(yǎng)基(SC增菌液...
冰凍切片免疫熒光實(shí)驗2024/1/15
1、冰凍切片固定冰凍切片37℃烘烤10至20分鐘，控干水分，置于4%多聚甲醛固定30min。于PBS緩沖液中晃動洗滌3次，每次5分鐘。2、抗原修復(fù)將切片浸沒在升滿EDTA抗原修復(fù)緩沖液（PH8.0）的...
RNA提取原理與詳細(xì)步驟2024/1/8
原理用Trizol的溶液提取，將總RNA與DNA和蛋白質(zhì)分離。Trizol是一種酸性溶液，含有硫氰酸胍(GITC)、苯酚和氯仿。GITC不可逆地使蛋白質(zhì)和RNase變性。隨后進(jìn)行離心。在酸性條件下，總...
蛋白酶K的作用及保存方法2024/1/2
作用：蛋白酶K在原位雜交技術(shù)中通常用于雜交前的處理，它具有消化包圍靶DNA蛋白質(zhì)的作用，以增強(qiáng)探針與靶核酸結(jié)合的機(jī)會，提高雜交信號。但蛋白酶K濃度過高、消化時間過長或孵育溫度過高時，都會對細(xì)胞結(jié)構(gòu)有一...
免疫熒光實(shí)驗中細(xì)胞爬片如何使用2023/12/25
首先是玻片的處理，普通的蓋玻片用砂輪劃成自己要的大小的小方塊，先用洗衣粉洗干凈，用水沖靜烤干，然后泡酸過夜，撈酸后流水洗凈，烤干，置于器皿中高壓滅菌，然后再烤箱中大約8小時烤干備用。爬片可以在培養(yǎng)皿六...
胎牛血清的功能有哪些？2023/12/20
胎牛血清應(yīng)取自剖腹產(chǎn)的胎牛;新牛血清取自出生24小時之內(nèi)的新生牛;小牛血清取自出生10-30天的小牛。胎牛血清是高的，因為胎牛還未接觸外界，血清中所含的抗體、補(bǔ)體等對細(xì)胞有害的成分最少。胎牛血清的功能...
胰蛋白酶如何在細(xì)胞培養(yǎng)中發(fā)揮作用2023/12/15
胰蛋白酶是一種消化酶，可分解許多脊椎動物消化系統(tǒng)中的蛋白質(zhì)。它存在于胰液中。如何在細(xì)胞培養(yǎng)中發(fā)揮作用質(zhì)膜上的蛋白質(zhì)負(fù)責(zé)多種功能，這些功能對于維持細(xì)胞的正常生理活動至關(guān)重要。一些質(zhì)膜蛋白（如鈣粘蛋白家族...
如何使用細(xì)胞分離液2023/12/11
細(xì)胞分離液的配置與使用：1、不同濃度分離液的制備:先用9份分離液與1份8.5％NaCl或1.5MPBS混合達(dá)到生理性滲透壓，然后用生理溶液稀釋到所需濃度。2、不連續(xù)密度梯度層的制備:先將試管壁用牛血清...
緩沖液配制操作流程2023/12/4
定義：緩沖溶液指的是由弱酸及其鹽、弱堿及其鹽組成的混合溶液，能在一定程度上抵消、減輕外加強(qiáng)酸或強(qiáng)堿對溶液酸堿度的影響，從而保持溶液的pH值相對穩(wěn)定。以常用的PBS磷酸緩沖溶液(不含鈣、鎂離子)為例，簡...
ELISA（酶聯(lián)免疫吸附）原理及步驟詳解2023/11/29
酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗1.原理：免疫分析是一種利用特定抗體與抗原或半抗原發(fā)生的高選擇性高特異性識別和結(jié)合原理，對待測抗體或者抗原進(jìn)行分析測定的方法，酶聯(lián)免疫吸附分析（下稱ELISA）是免疫分析的一種，分三個...
免疫熒光染色步驟和原理2023/11/22
免疫熒光染色是一種常用的細(xì)胞和組織學(xué)研究技術(shù)，它利用特異性抗體與標(biāo)記熒光染料結(jié)合，來檢測和定位細(xì)胞中的特定蛋白質(zhì)或其他分子。以下是免疫熒光染色的步驟和原理：步驟：1.細(xì)胞或組織樣品的固定：通常使用甲醛...
什么是離心管，需要注意哪些事項？2023/11/15
離心管(CentrifugeTube)是實(shí)驗室中常用的一種實(shí)驗耗材，主要用于離心實(shí)驗。離心管按大小可分為微量離心管和普通離心管，可以承受高速旋轉(zhuǎn)產(chǎn)生的離心力，通常微量離心管離心力測試最高可達(dá)21000...
在試驗中ELISA試劑盒的條件挑選2023/11/10
在ELISA試劑盒中，進(jìn)行各項試驗條件的挑選是很重要的，其間包括:（1）固相載體的挑選：許多物質(zhì)可作為固相載體，如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纖維素等。其形式可以是凹孔平板、試管、珠粒等。現(xiàn)在常用的...
電泳緩沖液的特點(diǎn)是什么？有何作用？2023/11/3
電泳緩沖液是核酸、蛋白質(zhì)凝膠電泳系統(tǒng)的一個重要組成，是電泳場中的導(dǎo)體，也是維持電泳系統(tǒng)恒定pH值的必要條件。常見的核酸電泳緩沖液有:TAE、TBE、TPE和MOPS等。電泳緩沖液的特點(diǎn)：1.TAE是使...
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