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激光共聚焦掃描顯微鏡主要有四部分組成
閱讀：2959 發(fā)布時(shí)間：2022-12-9 激光共聚焦掃描顯微鏡主要有四部分組成：1、顯微鏡光學(xué)系統(tǒng)。2、掃描裝置。3、激光光源。4、檢測(cè)系統(tǒng)。整套儀器由計(jì)算機(jī)控制，各部件之間的操作切換都可在計(jì)算機(jī)操作平臺(tái)界面中方便靈活地進(jìn)行。
1、顯微鏡光學(xué)系統(tǒng)
顯微鏡是顯微鏡的主要組件，它關(guān)系到系統(tǒng)的成象質(zhì)量。顯微鏡光路以無(wú)限遠(yuǎn)光學(xué)系統(tǒng)可方便地在其中插人光學(xué)選件而不影響成象質(zhì)量和測(cè)量精度。物鏡應(yīng)選取大數(shù)值孔徑平場(chǎng)復(fù)消色差物鏡，有利于熒光的采集和成象的清晰。物鏡組的轉(zhuǎn)換，濾色片組的選取，載物臺(tái)的移動(dòng)調(diào)節(jié)，焦平面的記憶鎖定都應(yīng)由計(jì)算機(jī)自動(dòng)控制。
2、掃描裝置
激光共聚焦掃描顯微鏡使用的掃描裝置在生物領(lǐng)域一般為鏡掃描。由于轉(zhuǎn)鏡只需偏轉(zhuǎn)很小角度就能涉及很大的掃描范圍，圖象采集速度大大提高，512×512畫(huà)面每秒可達(dá)4幀以上，有利于那些壽命短的離子作熒光測(cè)定。掃描系統(tǒng)的工作程序由計(jì)算機(jī)自動(dòng)控制。
3、激光光源
顯微鏡使用的激光光源有單激光和多激光系統(tǒng)。多激光器系統(tǒng)在可見(jiàn)光范圍使用多譜線(xiàn)氬離子激光器，發(fā)射波長(zhǎng)為457nm、488nm和514nm的藍(lán)綠光，氦氖綠激光器提供發(fā)射波長(zhǎng)為543nm的綠光，氦氖紅激光器發(fā)射波長(zhǎng)為633nm的紅光，新的405nm半導(dǎo)體激光器的出現(xiàn)可以提供近紫外譜線(xiàn)，但是小巧便宜而且維護(hù)簡(jiǎn)單。
4、檢測(cè)系統(tǒng)
激光共聚焦掃描顯微鏡為多通道熒光采集系統(tǒng)，一般有三個(gè)熒光通道和一個(gè)透射光通道，能升級(jí)到四個(gè)熒光通道，可對(duì)物體進(jìn)行多譜線(xiàn)激光激發(fā)，樣品發(fā)射熒光的探測(cè)器為感光靈敏度高的光電倍增管PMT，配有高速12位A/D轉(zhuǎn)換器，可以做光子計(jì)數(shù)。PMT前設(shè)置針孔，由計(jì)算機(jī)軟件調(diào)節(jié)針孔大小，光路中設(shè)有能自動(dòng)切換的濾色片組，滿(mǎn)足不同測(cè)量的需要,也有通過(guò)光柵或棱鏡分光后進(jìn)行光譜掃描功能的設(shè)置。