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對(duì)于血清的研究
點(diǎn)擊次數(shù)：1872 發(fā)布時(shí)間：2017-8-29
血清對(duì)于在傳統(tǒng)培養(yǎng)基配方中生長(zhǎng)和增殖的大多數(shù)細(xì)胞系來(lái)說(shuō)是需要的，因?yàn)榇蠖鄶?shù)單獨(dú)的培養(yǎng)基并不能提供細(xì)胞生長(zhǎng)所需要的全部營(yíng)養(yǎng)，如MEM培養(yǎng)基，較為常用的量為8％～10％的比例，原代培養(yǎng)使用量為15%～20%，而特殊的低血清培養(yǎng)基血清量可降至3％左右，細(xì)胞的形態(tài)和功能不受影響。
血清是非常復(fù)雜的混合物，成分多樣，對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)具有促進(jìn)作用：
1）提供基本營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，如氨基酸、維生素、無(wú)機(jī)物、脂類物質(zhì)、核酸衍生物等，是細(xì)胞生長(zhǎng)必須的物質(zhì)；
2）提供激素和各種生長(zhǎng)因子，如胰島素、腎上腺皮質(zhì)激素（、地塞米松）、類固醇激素（雌二醇、睪酮、孕酮）、成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子、表皮生長(zhǎng)因子、血小板生長(zhǎng)因子等；
3）提供結(jié)合蛋白，可攜帶重要的低分子量物質(zhì)，如白蛋白攜帶維生素、脂肪、以及激素等，轉(zhuǎn)鐵蛋白攜帶鐵，在細(xì)胞代謝過(guò)程中起重要作用；有些情況下結(jié)合蛋白能與有毒金屬和熱原質(zhì)結(jié)合，起到解毒作用；
4）血清能提供促接觸和伸展因子，使細(xì)胞貼壁免受機(jī)械損傷，對(duì)培養(yǎng)中的細(xì)胞起到某些保護(hù)作用；
5）能夠維持培養(yǎng)基的pH 值，起酸堿緩沖液作用；
6）有一些細(xì)胞，如內(nèi)皮細(xì)胞、骨髓樣細(xì)胞可以釋放蛋白酶，血清中含有抗蛋白酶成分，起到中和作用。這種作用是偶然發(fā)現(xiàn)的，現(xiàn)在則有目的的使用血清來(lái)終止胰蛋白酶的消化作用。因?yàn)橐鹊鞍酌敢呀?jīng)被廣泛用于貼壁細(xì)胞的消化傳代；
7）血清蛋白形成了血清的粘度，可以保護(hù)細(xì)胞免受機(jī)械損傷，特別是在懸浮培養(yǎng)攪拌時(shí)，粘度起到重要作用；
8）血清還含有一些微量元素和離子，它們?cè)诖x穩(wěn)定和解毒中起重要作用。
但是血清的加入也帶來(lái)了很多問(wèn)題：
1）血清的成分可能有幾百種之多，目前對(duì)其準(zhǔn)確的成分、含量及其作用機(jī)制仍不清楚，尤其是對(duì)其中一些多肽類生長(zhǎng)因子、激素和脂類等尚未充分認(rèn)識(shí)，這給研究工作帶來(lái)許多困難；
2）血清都是批量生產(chǎn)，各批量之間差異很大，這種差異來(lái)源于不同的制備方法和除菌方法、動(dòng)物的年齡差別及血清的儲(chǔ)存條件等，而且與取血?jiǎng)游锏膩?lái)源關(guān)系密切。不同的牧場(chǎng)、不同的氣候天氣及其他環(huán)境因素都可能影響血清的質(zhì)量。要保證每批血清的相似性極為困難，從而使實(shí)驗(yàn)的標(biāo)準(zhǔn)化和連續(xù)性受到限制。因此選好了一種血清就要盡可能長(zhǎng)期使用它。在需要更換時(shí)，也要盡量保持與原有的一批血清相似?，F(xiàn)在很多公司都提供血清預(yù)留，你一旦選定了某個(gè)批次的血清，備足一年的量，這樣可以避免很多麻煩；
3）對(duì)大多數(shù)細(xì)胞，在體內(nèi)狀態(tài)，血清不是它們接觸的生理學(xué)液體，只是在損傷愈合以及血液凝固過(guò)程中才接觸血清，因此使用血清有可能改變某種細(xì)胞在體內(nèi)的正常狀態(tài)，血清可能促進(jìn)某些細(xì)胞的生長(zhǎng)（成纖維細(xì)胞）同時(shí)抑制另一類細(xì)胞生長(zhǎng)（表皮細(xì)胞）；
4）血清含一些對(duì)細(xì)胞產(chǎn)生毒性的物質(zhì)，如多胺氧化酶，能與來(lái)自高度繁殖細(xì)胞的多胺反應(yīng)（如精胺、亞精胺）形成有細(xì)胞毒性作用的聚精胺，補(bǔ)體、抗體、細(xì)菌毒素等都會(huì)影響細(xì)胞生長(zhǎng)，甚至造成細(xì)胞死亡；
5）血清取材中可能帶入支原體、病毒，如具有爭(zhēng)議的黑膠蟲，對(duì)細(xì)胞產(chǎn)生潛在影響；