【貨號】 BP-DL232

【規(guī)格】 50mL/100mL

【保存】 10~30℃，避光，12個(gè)月有效。

【產(chǎn)品組成】

【產(chǎn)品簡介】

臺盼藍(lán)(Trypan blue)又稱錐藍(lán)或錐蟲藍(lán)等，是一種陰離子型染料，常用于檢測細(xì)胞活率。臺盼藍(lán)不能透過活細(xì)胞完整的細(xì)胞膜，故活細(xì)胞不著色，即產(chǎn)生所謂的拒染現(xiàn)象,而死亡細(xì)胞的細(xì)胞膜通透性增加，可使染料通過細(xì)胞膜進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)，使死細(xì)胞著色呈藍(lán)色。通常認(rèn)為細(xì)胞膜完整性喪失，即可認(rèn)為細(xì)胞已經(jīng)死亡。因此，借助臺盼藍(lán)染色可以非常簡便、快速地區(qū)分活細(xì)胞和死細(xì)胞。

臺盼藍(lán)染色液(1%)常用于檢測細(xì)胞膜的完整性以及細(xì)胞是否存活?；罴?xì)胞不會被染成藍(lán)色，而死細(xì)胞會被染成淡藍(lán)色。臺盼藍(lán)可被巨噬細(xì)胞吞噬，故也可用于巨噬細(xì)胞的活體染色劑。臺盼藍(lán)染色后，通過顯微鏡下直接計(jì)數(shù)或顯微鏡下拍照后計(jì)數(shù)，就可以對細(xì)胞存活率進(jìn)行比較精確的定量，染色時(shí)間只需3~5min，操作簡單。

【使用方法】 

1、收集細(xì)胞：

如果收集貼壁細(xì)胞，應(yīng)用-EDTA溶液消化細(xì)胞，收集細(xì)胞。如果收集懸浮細(xì)胞，則可以直接收集細(xì)胞。收集好的細(xì)胞在1000rpm離心5min，棄上清，用1ml PBS重新懸浮細(xì)胞沉淀。

2、臺盼藍(lán)染色：

向細(xì)胞懸液中加入臺盼藍(lán)染色液(1%)輕輕混勻，室溫染色3min(染色時(shí)間可適當(dāng)延長，但不宜超過10min)。

3、細(xì)胞計(jì)數(shù)：

吸取少量經(jīng)過染色后的細(xì)胞，用計(jì)數(shù)，鏡下可觀察到死細(xì)胞著藍(lán)色并膨大無光澤，活細(xì)胞不著色，維持正常形態(tài)有光澤。

通常如果要比較精確地進(jìn)行定量，每個(gè)細(xì)胞樣品至少需要數(shù)500個(gè)細(xì)胞，數(shù)出藍(lán)色細(xì)胞和細(xì)胞總數(shù)。細(xì)胞存活率計(jì)算公式如下：

細(xì)胞存活率＝(細(xì)胞總數(shù)－藍(lán)色細(xì)胞數(shù))/細(xì)胞總數(shù)×99%。

【染色結(jié)果】

【注意事項(xiàng)】

1、臺盼藍(lán)對人體有輕微毒性，請注意小心防護(hù)。

2、注意凋亡小體偶爾也有臺盼藍(lán)拒染現(xiàn)象。

3、為了您的安全和健康，請穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。