Realassay®維生素B12 檢測試劑盒基于國標 GB 5009.285 研制，操作簡易。利用微生物生長特異性需要維生素而實現(xiàn)檢測，該試劑盒用于定量檢測食品中的wss B12 總量（包括添加和原生維生素B12）。本試劑盒提供 96 次檢測（包括標準品），使用酶標儀（610 - 630 nm 或者 540 - 550 nm）進行讀數(shù)。該試劑盒具有以下特點：? 1、即用型標準品無需梯度稀釋，直接加水混合即用? 2、培養(yǎng)24 - 26 h即可讀取數(shù)據(jù)

維生素B12是從樣品稀釋提取所獲得的。將經(jīng)過稀釋的提取物和維生素B12檢測培養(yǎng)基加入包被有Lactobacillusdedelbrueckikii subspsp. lactis is （leichmannii）的微孔中。Lactobacillus dedelbrueckikii的生長狀況取決于wssB12的含量。在維生素B12測試培養(yǎng)基中，添加維生素B12標準品或含維生素B12的樣品提取液，細菌會一直生長直至維生素B12被消耗wq。孵育條件應(yīng)為黑暗、37 °C條件下孵育24 - 26小時，然后通過酶標儀在610 - 630 nm （或者540 - 550 nm）讀取結(jié)果，根據(jù)wssB12標準品濃度和相應(yīng)的細菌OD值繪制成標準曲線，并計算出樣品中維生素B12含量

B12濃縮樣品提取液使用前需充分混勻（如有結(jié)晶析出，可適當加熱溶解，溫度不超過60℃），稀釋20倍后備用。如：50 mL濃縮液 + 950 mL超純水充分溶解。6.2 含強化wss B12 的嬰兒食品，谷物，飲料或維生素預(yù)混料等樣品稱量 1 g（mL）均質(zhì)樣品至一個 50 mL 無菌離心管中，準確加入 40 mL 稀釋后樣品提取液，搖勻，確保樣品溶解wq、無結(jié)塊。在 95 – 99 °C 水浴中溫育 30 min（加熱后注意蓋子是否松動，冷卻前應(yīng)擰緊）。使用冰水或流動水流迅速冷卻至 30 °C 以下。然后 8000 g 離心 5 min（若樣品經(jīng)離心后分層不明顯或上層較分散，建議再次離心 5 min），離心后，使用 0.22 μm 濾膜過濾脂肪層下的樣品溶液備用。以上步驟樣品稀釋 40 倍，根據(jù)濃度范圍，確定是否在 1.5 mL（或2.0 mL）無菌試管中進一步稀釋過濾后的樣品溶液。