MR05301 miRNA cDNA 合成試劑盒（加尾法
- 公司名稱 廣州市百菱生物科技有限公司
- 品牌 莫納生物
- 型號 MR05301
- 產(chǎn)地 廣東省廣州市海珠區(qū)大塘
- 廠商性質(zhì) 代理商
- 更新時間 2021/12/31 18:14:53
- 訪問次數(shù) 162
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廣州市旭澤生物科技有限公司（Guangzhou Xuze BioTechnology Co., Ltd.）是一家生產(chǎn)及代理銷售生物相關(guān)行業(yè)高科技產(chǎn)品的公司。公司以經(jīng)營各種科學(xué)實驗儀器、生化試劑、實驗室消耗品為主，致力引進(jìn)國外的*技術(shù)及產(chǎn)品，為中國廣大客戶提供優(yōu)質(zhì)服務(wù)。公司在廣州建立大量庫存，能夠保證向用戶提供迅捷的服務(wù)。 公司代理銷售特色優(yōu)勢產(chǎn)品：美國KIRGEN細(xì)菌接種環(huán)、培養(yǎng)皿、培養(yǎng)瓶，PCR耗材，加拿大Lablabs無菌采樣袋，美國sigma，美國康寧Corning ，德國WAK，美國BIO-RAD 常規(guī)耗材和電泳系列，美天妮 ，武漢華美等眾多產(chǎn)品。
| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 20 RXNS |
|---|---|---|---|
| 貨號 | MR05301S | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,化工,生物產(chǎn)業(yè) |
| 主要用途 | 核酸 > 逆轉(zhuǎn)錄 | MR05301S | 20 RXNS |
產(chǎn)品描述
microRNA (miRNA) 是一種長約18~25個核苷酸的非編碼RNA，對基因的表達(dá)調(diào)控發(fā)揮著重要的作用。對于miRNA的實時定量PCR與以往的PCR有些不同，這主要是因為miRNA的自身結(jié)構(gòu)比較特殊，特點就是長度過于短小，僅僅二十幾個堿基的核酸片段無法直接應(yīng)用常規(guī)的PCR技術(shù)擴(kuò)增。所以，在針對miRNA的PCR技術(shù)中，必須要延長待測miRNA的長度，構(gòu)建出一個足夠長的PCR模板，才能進(jìn)一步應(yīng)用PCR技術(shù)來定量分析。本試劑盒采用加A法來進(jìn)行miRNAcDNA的反轉(zhuǎn)錄。具體過程是先通過E.coli Poly(A) Polymerase在miRNA3' 末端加多聚A尾Poly(A)，再使用Oligo(dT)-UniversalTag通用逆轉(zhuǎn)錄引物進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄反應(yīng)，最終生成miRNA對應(yīng)的cDNA。microRNA逆轉(zhuǎn)錄合成試劑盒采用了雙組分形式，簡化了實驗操作流程，降低了操作失誤的可能性。本產(chǎn)品中的miRNA RT Enzyme Mix包含了E.coli Poly(A)Polymerase和RTase。其中的E.coliPoly(A) Polymerase不但具有高效的加A尾效率，還可特異性識別單鏈miRNA，從而避免了具有雙鏈結(jié)構(gòu)的miRNA前體的進(jìn)一步逆轉(zhuǎn)錄反應(yīng)；RTase經(jīng)過分子改造，去掉了RNase H活性，增加了RNA模板親和力，從而使得miRNA的逆轉(zhuǎn)錄反應(yīng)具有更高的效率和靈敏度。本產(chǎn)品中的2× miRNA RT Reaction Buffer包含了miRNA加A尾反應(yīng)和逆轉(zhuǎn)錄反應(yīng)的所有原料和引物，并經(jīng)過精心優(yōu)化，可保證miRNA 3' 末端的Poly(A) 修飾過程和逆轉(zhuǎn)錄過程同時高效進(jìn)行。模板總RNA的使用范圍可達(dá)5 pg~4 μg（質(zhì)量范圍）。
注意事項：
1. 本試劑盒能給所有單鏈 RNA 加尾并進(jìn)行 cDNA 合成，如需高效獲得研究的 microRNA cDNA，可選擇 Small RNA (≤200nt) 提取試劑盒提取純化 Small RNA 再進(jìn)行加尾和 cDNA 合成；
2. 本試劑盒含有 RNaseInhibitor，操作過程中仍應(yīng)注意預(yù)防
RNase 污染。經(jīng)常更換新手套，使用無 RNase 的塑料制品和槍頭避免交叉污染。
產(chǎn)品名稱
miRNA cDNA 合成試劑盒（加尾法）（MR05301S） | 貨號 | 規(guī)格 |
| MR05301S | 20 RXNS |
產(chǎn)品組成
| 試劑組成 | MR05301S |
| 2× miRNA RT Reaction Buffer | 100 μl |
| miRNA RT Enzyme Mix | 20 μl |
| Universal-qPCR-3' primer (10 μM) | 250 μl |
| Nuclease-Free Water | 1 ml |
注意：
1. 下游 qPCR 檢測用戶需根據(jù)自身具體研究對象合成 miRNA-specific 5'
primer；
2. qPCR Mix 推薦使用 Monad 化學(xué)染料法定量 PCR 預(yù)混液（獨立
ROX）（貨號 MQ00401）；
3. 用戶可根據(jù)自身需求設(shè)計研究物種內(nèi)參引物；
人 U6 參考引物如下：
Hsa-U6-Forward Primer: CTCGCTTCGGCAGCACA
Hsa-U6-Reverse Primer: AACGCTTCACGAATTTGCGT
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