大鼠髓過氧化物酶(MPO)Elisa試劑盒
- 公司名稱 上海雅吉生物科技有限公司
- 品牌 其他品牌
- 型號
- 產(chǎn)地
- 廠商性質(zhì) 經(jīng)銷商
- 更新時間 2024/10/25 12:16:10
- 訪問次數(shù) 360
聯(lián)系方式:高杰15821073967 查看聯(lián)系方式
聯(lián)系我們時請說明是化工儀器網(wǎng)上看到的信息,謝謝!
供貨周期 | 現(xiàn)貨 |
---|
大鼠髓過氧化物酶(MPO)Elisa試劑盒ELISA的基礎(chǔ)是抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標(biāo)記。結(jié)合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學(xué)活性,酶標(biāo)記的抗原或抗體既保留其免疫學(xué)活性,又保留酶的活性。在測定時,受檢標(biāo)本(測定其中的抗體或抗原)與固相載體表面的抗原或抗體起反應(yīng)。用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原抗體復(fù)合物與液體中的其他物質(zhì)分開。再加入酶標(biāo)記的抗原或抗體,也通過反應(yīng)而結(jié)合在固相載體上。此時固相上的酶量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量呈一定的比例。加入酶反應(yīng)的底物后,底物被酶催化成為有色產(chǎn)物,產(chǎn)物的量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量直接相關(guān),故可根據(jù)呈色的深淺進(jìn)行定性或定量分析。
規(guī)格:48T 96T
檢 測 范 圍 :7pg/ml-220pg/ml
使 用 目 的 :本試劑盒用于測定山羊血清、血漿及相關(guān)液體樣本中小反芻獸疫抗體(PPRAb)含量。
標(biāo) 本 要 求
1.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實驗。若不能
馬上進(jìn)行試驗,可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融
2.不能檢測含 NaN3 的樣品,因 NaN3 抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
大鼠髓過氧化物酶(MPO)Elisa試劑盒試劑及試劑配制
1. 抗原及酶標(biāo)記抗體
①抗原: IgG
②酶標(biāo)抗抗體:羊抗鼠IgG-HRP
2.包被液(CBS):Na2CO3 0.8g,NaHCO3 1.46g,水溶解,定容500ml。
3. 封閉液(3%BSA+CBS 或5%牛奶+CBS):含3%牛血清白蛋白(BSA):10mL CBS中加入0.3g BSA。含5%荷蘭牛奶:10mL CBS中加入0.5g牛奶 。
4. 洗滌液(PBST 10*):KH2PO4 4g,Na2HPO4·12H2O 58g,NaCl 160g, KCl 4g,Tween-20 10mL 加水定容2L。
5. 洗滌液(1*PBS): PBST:H2O=1:9
6. 底物溶液(4甲基酰苯氨) ①TMB底物緩沖液(0.005mol/LPH3.6醋酸鈉-檸檬酸緩沖液):稱NaAc·3H2O:1.13g,C6H8O7·H2O :1.05g,用蒸餾水溶解,定容至1000mL,調(diào)PH=3.6。 ② TMB底物液:稱3,3',5,5'-四甲基聯(lián)苯胺(TMB)0.08g 溶于40mL 二甲基亞砜(DMSO)中,加60 mL 甲醇,混勻,加100mL 底物緩沖液,在暗處避光攪拌2小時至溶解,4℃避光保存。 ③H2O2 底物液:取140μL過氧化氫(H2O2)加入200mL底物緩沖液混勻。 ④底物應(yīng)用液:現(xiàn)用現(xiàn)配,TMB:H2O2=1:1混勻。
7. 終止液:2mol/L H2SO4
大鼠髓過氧化物酶(MPO)Elisa試劑盒操作步驟
①抗原包被過夜(12h以上): IgG抗原,用包被液(CBS)稀釋,100μL/孔加入聚苯乙烯96孔反應(yīng)板中。4℃放置過夜。 抗原用量:0.1μg*100N/抗原濃度 (N為板數(shù))
②封閉:棄上清 加300μL/孔封閉液,37℃放置2h。
③洗滌:用洗滌液洗3次
④加一抗(待測樣品為細(xì)胞培養(yǎng)上清):將含單克降抗體的細(xì)胞培養(yǎng)上清100μL /孔加到已包被的板上,空白培養(yǎng)基作為陰性對照,已知樣品血清(1:200稀釋于1%BSA+PBST中)作為陽性對照。37℃恒溫箱溫育2h。 測免疫效價待測樣品為小鼠血清時:采小鼠血液于常溫20min左右后放4℃至析出血清,3000r 10min離心。將含抗體的血清在已包被的板上用1%BSA+PBST連續(xù)倍比稀釋(按照1:200開始),100μL /孔。每個樣品平行做兩份,小鼠陰性血清或空白培養(yǎng)基作為陰性對照,已知樣品作為陽性對照。37℃恒溫箱溫育2h。
⑤洗滌:用洗滌液洗5次。
⑥加二抗(酶標(biāo)抗抗體):羊抗鼠IgG-HRP,用1%BSA+PBST l :10000稀釋,100μL/孔, 37℃恒溫箱溫育1h。
⑦洗滌:用洗滌液洗5次,
⑧顯色:加新鮮配制的底物溶液(TMB:H2O2=1:1)100μL/孔,37℃恒溫箱放置10min,顯示藍(lán)色。
⑨終止反應(yīng)、比色:加30μL/孔H2SO4終止液.顏色變黃;用酶標(biāo)儀測定450nm 630nm處各孔的吸光值,陽性反應(yīng)的zui大稀釋度為待測樣品的效價。
大鼠髓過氧化物酶(MPO)Elisa試劑盒相關(guān)產(chǎn)品如下:
人胚腎細(xì)胞 293T
人卵巢癌細(xì)胞 3AO
人膀胱癌細(xì)胞 5637
人高轉(zhuǎn)移鼻咽癌細(xì)胞系 5-8F
人腎細(xì)胞腺癌細(xì)胞 769-P
人腎透明細(xì)胞癌細(xì)胞 786-O
人高轉(zhuǎn)移肺癌細(xì)胞 95-D
人膠質(zhì)母細(xì)胞瘤細(xì)胞 A172
人橫紋肌肉瘤細(xì)胞 A-204
人卵巢癌細(xì)胞 A2780
人T淋巴細(xì)胞白血病細(xì)胞 A3
人惡性黑色素瘤細(xì)胞 A375
人惡性黑色素瘤細(xì)胞 A375-EGFP
人皮膚黑色素瘤細(xì)胞 A375
人表皮癌細(xì)胞 A431(A-431)
人腎癌細(xì)胞 A498
人肺癌細(xì)胞 A549
人橫紋肌瘤細(xì)胞 A673
人黑色素瘤細(xì)胞 A875
人腎細(xì)胞腺癌細(xì)胞 ACHN
人胃腺癌細(xì)胞 AGS
人子宮內(nèi)膜腺癌細(xì)胞 AN3 CA
人視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞 ARPE-19
人轉(zhuǎn)移胰腺腺癌細(xì)胞 AsPC-1
人肝癌細(xì)胞 Bel-7402
人肝癌細(xì)胞氟尿嘧啶耐藥株 Bel7402/Fu
人肝癌細(xì)胞 Bel-7405
人乳腺導(dǎo)管癌細(xì)胞 BT-474
人乳腺導(dǎo)管癌細(xì)胞 BT-549
人膀胱癌細(xì)胞 BT-B
人膀胱癌細(xì)胞 BT-B
人原位胰腺腺癌細(xì)胞 BxPC-3
人宮頸癌細(xì)胞 C-33A
人結(jié)腸腺癌細(xì)胞 Caco-2
人肺癌細(xì)胞 Calu-1
人肺腺癌細(xì)胞 Calu-3
人退行性癌細(xì)胞 calu-6
人胰腺癌細(xì)胞 Capan-1
人胰腺癌細(xì)胞 Capan-2
人宮頸癌細(xì)胞 CaSKi
人急性淋巴細(xì)胞白血病細(xì)胞 CCRF-CEM
人急性淋巴細(xì)胞白血病細(xì)胞 CEM/C1
HeLa [Chang Liver] Chang Liver