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流式細胞儀結(jié)構簡介
2020年05月28日 17:51:39 來源:化工儀器網(wǎng) 點擊量:4604

流式細胞儀(Flow cytometer )是對細胞進行自動分析和分選的裝置。它可以快速測量、存貯、顯示懸浮在液體中的分散細胞的一系列重要的生物物理、生物化學方面的特征參量,并可以根據(jù)預選的參量范圍把指定的細胞亞群從中分選出來。

  【化工儀器網(wǎng) 技術指導】流式細胞儀(Flow cytometer )是對細胞進行自動分析和分選的裝置。它可以快速測量、存貯、顯示懸浮在液體中的分散細胞的一系列重要的生物物理、生物化學方面的特征參量,并可以根據(jù)預選的參量范圍把指定的細胞亞群從中分選出來。
 
  流式細胞儀主要由四部分組成:流動室和液流系統(tǒng)、激光源和光學系統(tǒng)、光電管和檢測系統(tǒng)、計算機和分析系統(tǒng)。
 
  流動室和液流系統(tǒng)
 
  流動室由樣品管、鞘液管和噴嘴等組成,常用光學玻璃、石英等透明、穩(wěn)定的材料制作。設計和制作均很精細,是液流系統(tǒng)的心臟。為了保證液流是穩(wěn)液,一般限制液流速度υ<10m/s。由于鞘液的作用,被檢測細胞被限制在液流的軸線上。
 
  激光源和光學系統(tǒng)
 
  經(jīng)特異熒光染色的細胞需要合適的光源照射激發(fā)才能發(fā)出熒光供收集檢測。常用的光源有弧光燈和激光;激光器又以氬離子激光器為普遍,也有配和氪離子激光器或染料激光器。在免疫分析中常要同時探測兩種以上的波長的熒光信號,就采用二向色性反射鏡,或二向色性分光器,來有效地將各種熒光分開。
 
  光電管和檢測系統(tǒng)
 
  經(jīng)熒光染色的細胞受合適的光激發(fā)后所產(chǎn)生的熒光是通過光電轉(zhuǎn)換器轉(zhuǎn)變成電信號而進行測量的。光電倍增管(PMT)為常用。PMT的響應時間短,僅為ns數(shù)量級;光譜響應特性好,在200~900nm的光譜區(qū),光量子產(chǎn)額都比較高。從PMT輸出的電信號仍然較弱,需要經(jīng)過放大后才能輸入分析儀器。
 
  流式細胞計中一般備有兩類放大器。一類是輸出信號輻度與輸入信號成線性關系,稱為線性放大器。另一類是對數(shù)放大器,輸出信號和輸入信號之間成常用對數(shù)關系。
 
  計算機和分析系統(tǒng)
 
  經(jīng)放大后的電信號被送往計算機分析器。多道的道數(shù)是和電信號的脈沖高度相對應的,也是和光信號的強弱相關的。多道分析器出來的信號再經(jīng)模-數(shù)轉(zhuǎn)換器輸往微機處理器編成數(shù)據(jù)文件,或存貯于計算機的硬盤和軟盤上,或存于儀器內(nèi)以備調(diào)用。計算機的存貯容量較大,可存貯同一細胞的6~8個參數(shù)。存貯于計算機內(nèi)的數(shù)據(jù)可以在實測后脫機重現(xiàn),進行數(shù)據(jù)處理和分析,后給出結(jié)果。
 
  除上述四個主要部分外,流式細胞儀還備有電源及壓縮氣體等附加裝置。
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