慶大霉素普魯卡因維B₁₂顆粒為復方制劑，其組分為每袋含硫酸慶大霉素20mg；鹽酸普魯卡因0.1g；維生素B₁₂（Vitamin B₁₂，V B₁₂）0.02mg。所用輔料包括甘露醇、阿司帕坦、食用蘋果香精、羧甲基纖維素鈉和檸檬黃。其中V B₁₂的含量極低，難于準確定量。目前，國內尚無檢測慶大霉素普魯卡因維生素B₁₂顆粒中微量V B₁₂的含量測定方法，國外藥典也未見收藏。國內用于檢測V B₁₂的方法多采用微生物法；不少文獻報道使用HPLC法測定微量的V B₁₂，多由于靈敏度不夠等原因，無法準確檢測藥品中的微量V B₁₂；此外，近些年國內外已有文獻報道使用電化學方法測定B₁₂的含量，但方法復雜，繁瑣。

  快速分離液相色譜（Ｒapidresolutionliquidchro-matography，ＲＲLC）是近年來迅速發(fā)展的液相色譜新技術，其原理是通過增加液相系統(tǒng)耐高壓性能，降低色譜柱固定相粒徑、色譜柱內徑及長度，從而提高色譜柱柱效，實現(xiàn)縮短分析時間，提高分離度和靈敏度的目的。

  可采用ＲＲLC法測定慶大霉素普魯卡因維生素B₁₂顆粒中微量V B₁₂的含量，方法簡便、快速、準確，靈敏度高。

  所需儀器：快速分離液相色譜儀（配G1312B二元泵，檢測器，柱溫箱，脫氣機，500μL擴展進樣環(huán)及色譜工作站）。

  色譜條件：（3.0mm×150mm，1.8μm）；流動相：0.005mol/L磷酸二氫鉀溶液（每1000mL加磷酸0.5mL）－甲醇（75∶25），流速：0.5mL/min。檢測波長：361nm，柱溫：40℃，進樣量：200μL。